Тип симметрии вируса натуральной оспы

Таксономия.Вирус
натуральной ос­пы — ДНК-содержащий,
семейство Poxviridae,
род
Orthopoxvirus.

Морфология
и антигенная структура.
Вирионы
поксвирусов имеют кирпичеобразную или
овоидную форму. Вирус натуральной оспы
— один из самых крупных вирусов, обнаружен
в световом мик­роскопе. Вирионы видны
при специальных методах окраски в виде
так называемых элементарных телец
Пашена (ок­раска серебрением по
Морозову). Поверхность вириона состоит
из нитевидных, овоидных эле­ментов.
Оболочка и наружная мембрана вири­она
заключают сердцевину (ДНК и белки) и
мембрану сердцевины. Геном вириона —
двунитевая линейная ДНК с ковалентно
замкнутыми кон­цами. Вирусы имеют
более 30 структурных белков. Антигены —
нуклеопротеиновый, растворимые и
гемагглютинин; имеются общие ан­тигены
с вирусом вакцины.

Культивирование.Вирус
размножается: в куриных эмбрионах с
образованием белых бляшек на
хорион-аллантоисной оболочке; в культуре
клеток, в цитоплазме которых формируются
ха­рактерные околоядерные включения.

Резистентность.Вирусы
устойчивы к вы­сушиванию и низким
температурам, нечувс­твительны к
эфиру. Моментально погибают при 100С, а
при 60С — через 15 мин.

Эпидемиология.Особо
опасная конвенционная (ка­рантинная)
инфекция. Источником инфек­ции является
больной человек, который заразен с
последних дней инкубационного периода
и до отпадения корок высыпаний.
Инфицирование происходит воздушно-капель­ным,
воздушно-пылевым, а также контактно-бытовым
путями при соприкосновении с ве­щами
больного, загрязненными слизью, гноем,
калом и мочой, содержащими вирус.

Патогенез.
Вирус прони­кает через слизистые
оболочки верхних ды­хательных путей,
реже — через кожу и после размножения
в регионарных лимфатических узлах
попадает в кровь. Из крови возбудитель
заносится в кожу и лимфоидные ткани, в
которых происходит размноже­ние
вирусов, формируются очаги поражения
в коже, слизис­тых оболочках и
паренхиматозных органах. Характерно
образование папулезных высыпаний.

Клиника.Инкубационный
период 7—17 дней. Заболевание проявляется
высокой температурой тела, рвотой,
головной и поясничной болями, появлением
сыпи. Первоначально сыпь имеет вид
розовых пятен, которые затем переходят
сначала в узелки — папулы, а затем — в
пузырьки (везикулы) и пустулы , подсыхающие
и превращающиеся в корки.

Различают
несколько форм оспы: тяжелую
(пустулезно-геморрагическая); среднетяжелую;
легкую (оспа без сыпи, оспа без повыше­ния
температуры тела).

Иммунитет.
После перенесенной болезни формируется
стойкий пожизненный иммуни­тет,
обусловленный появлением вируснейтрализующих
антител, интерферонов и актива­цией
факторов клеточного иммунитета.

Микробиологическая
диагностика.
Исследуют содержимое элементов сыпи,
отделяемое носоглотки, кровь, пора­женные
органы и ткани. Вирус выявляют при
электронной микроскопии, в РИФ, РП, по
образованию телец Гварниери. Выделяют
вирус путем заражения куриных эмбрионов
и культур клеток с последующей
идентифика­цией в реакции нейтрализации
(на куриных эмбрионах), РСК, РТГА.
Серологическую диагностику проводят
в РТГА, РСК, РИГА, реакции нейтрализации.

Лечение.
Симптоматическое; ин­дукторами
интерферона и противовирусными
препаратами.

Профилактика.
Прочный им­мунитет создает живая
оспенная вакцина. Ее готовят из соскобов
сыпи телят или при культи­вировании
вируса вакцины (осповакцины) на куриных
эмбрионах. Вакцину вводят накожно.
Разработана оральная таблетированная
вакцина, менее реактогенная.

1

1,1Д.
И. Ивановский – основоположник
вирусологии. Вирусы: понятие, отличительные
особенности.

Он
дал классич. описание мозаичной болезни
табака, разработал меры борьбы с ней и
впервые установил характер возбудителя
этого заболевания (1892); показал, что этот
возбудитель невидим при самых сильных
увеличениях микроскопа, проходит через
мелкопористые фильтры и не растет на
обычных питательных средах, чем резко
отличается от бактерий. На основании
многочисленных опытов Ивановский сделал
вывод, что открытый им возбудитель не
является жидким веществом, т. к.
задерживается на наиболее мелкопористых
фильтрах, пропускающих настоящие
жидкости. Вместе с тем он является живым,
т. к. антисептики для него такое же
дезинфицирующее вещество, как и для
бактерий. Данные Ивановского о передаче
заболевания показали также, что оно
обусловлено именно специфич. возбудителем,
а не плазмой больного растения; этот
возбудитель, по мнению Ивановского, —
живой мельчайший организм.

Вирус
– неклеточная форма организации материи,
обладающая собственным геномом и
способностью к воспроизведению в клетках
других организмов.

Отличительные
особенности: наличие только одного вида
нуклеиновой кислоты, отсутствие клеточной
организации, отсутствие белоксинтезирующих
систем; неспособность к росту и бинарному
делению, а воспроизведение только за
счет собственной НК; паразитизм на
генетическом уровне

Семейство:
Poxviridae,
подсем-во: Chordopoxvirinae,
Род: Orthopoxvirus

ДНК-содержащий,
сложный, крупный,
­­­­­­­­­­­­­­­­_______________________.
Размножается в цитоплазме с образованием
включений. Вирус натуральной оспы имеет
антигенное родство с эритроцитами
группы А крови человека, что обусловливает
слабый иммунитет, высокую заболеваемость
и смертность соответствующей группы
лиц. Он устойчив к воздействию внешней
среды, особенно к высушиванию и низким
температурам.

Профилактика:
осповакцина (предложена в 1796г Дженнером)

Особое
значение в истории борьбы с оспой в
России был 1768 год. В этот год оспа достигла
такого размаха, что под угрозой была
царская семья, даже погибли несколько
фрейлин. Из Англии был приглашен
Димодаль. Именно ему предложили привить
оспу русской императрице Екатерине II
и наследнику престола Павлу Петровичу,
будущему императору Павлу I.

Оспенный
материал был взят от крестьянского
мальчика Маркова, впоследствии получившего
дворянство и фамилию Оспенный.

Прививка,
сделанная Екатерине и наследнику, должна
была стать примером для всех подданных.
После были открыты дома для оспопрививания.

1,3 Лабораторная диагностика гриппа: материал, методы.

И.м.
– смывы и мазки из носоглотки,
мазки-отпечатки из носовой полости и
кровь. Основные методы диагностики –
вирусоскопический, вирусологический,
серологический.

Экспресс-диагностика:
аг вируса в мазках-отпечатках из носа
и смывов носоглотки (РИФ, ИФА)

Выделение
возбудителя проводят заражением куриных
эмбрионов (реже клеточных культур).
Вирусы гриппа проявляют слабое ЦПД.

Типовую
принадлежность вируса определяют в
РСК, подтип гемагглютинина в РТГАЮ
подтип нейраминидазы в реакции
ингибирования активности фермента.

В
крови ат определяют с помощью РТГА, РСК,
РН, ИФА в парных сыворотках с интервалом
в 8-14 суток. Для подтверждения заболевание
увеличение титра должно быть в 4 и более
раз.

1,4
Вакцина Энджерикс В. Что содержит, для
чего и как применяется

Содержит
рекомбинантный поверхностный антиген
вируса гепатита В (HBsAg). Применяется для
специфической профилактики гепатита
В, D.
и их осложнений (цирроз печени, рак
печени). Ставится в/м.

2

2,1
Морфология, структура и химический
состав вирусов

Вирусы
могут существовать в двух формах:
внеклеточной (вириона) и внутриклеточной
(вируса).

По
форме вирионы могут быть: округлыми,
палочковидными, в виде правильных
многоугольников, нитевидными и др.
Размеры их колеблются от 15–18 до 300–400
нм. В центре вириона – вирусная нуклеиновая
кислота, покрытая белковой оболочкой
– капсидом, который имеет строго
упорядоченную структуру. Капсидная
оболочка построена из капсомеров.
Нуклеиновая кислота и капсидная оболочка
составляют нуклеокапсид. Геном вирусной
частицы гаплоидный. Нуклеокапсид
сложноорганизованных вирионов покрыт
внешней оболочкой – суперкапсидом.
Сложно организованные вирусы содержат
дополнительные оболочки, белковые или
липопротеидные, и имеют более сложный
химический состав. Помимо нуклеиновой
кислоты и белков, они содержат липиды
в наружных оболочках и углеводы в составе
белков’ наружных оболочек (гликопротеидов).
Обычно липиды и углеводы имеют клеточное
происхождение. В составе некоторых
вирусов обнаруживаются также клеточные
нуклеиновые кислоты и белки.ДНК может
быть:

1)
двухцепочечной; 2) одноцепочечной; 3)
кольцевой; 4) двухцепочечной, но с одной
более короткой цепью; 5) двухцепочечной,
но с одной непрерывной, а с другой
фрагментированной цепями. РНК может
быть: 1) однонитевой; 2) линейной двухнитевой;
3) линейной фрагментированной; 4) кольцевой;
5) содержащей две одинаковые однонитевые
РНК.

Вирусные
белки подразделяют на: 1) геномные –
нуклеопротеиды. Обеспечивают репликацию
вирусных нуклеиновых кислот и процессы
репродукции вируса; 2) белки капсидной
оболочки – простые белки, обладающие
способностью к самосборке. Они складываются
в геометрические структуры, в которых
различают несколько типов симметрии:
спиральный, кубический или смешанный;
3) белки суперкапсидной оболочки – это
сложные белки. Выполняют защитную и
рецепторную функции.

Среди
белков суперкапсидной оболочки выделяют:
а) якорные белки (обеспечивают контакт
вириона с клеткой); б) ферменты (могут
разрушать мембраны); в) гемагглютинины
(вызывают гемагглютинацию); г) элементы
клетки хозяина.

2,2
Вирус гриппа. Классификация, характеристика.
Методы профилактики профессионального
заражения в ЛПУ.

Сем-во:
Orthomixoviridae,
Род: Influenzavirus
ABC.
–РНК содержащие вирусы, сложные,
средние, со спиральным типом симметрии.
РНК состоит из 8 отдельных сегментов.

Вирус
передается воздушно-капельным путем,
следовательно надо носить маски, которые
будут защищать верхние отделы дых.путей.
Вирус чувствителен к УФ-облучению,
производить регулярно кварцевание
помещений.

2,3
Лабораторная диагностика натуральной
оспы: материал, методы.

И.м.
– содержимое пузырьков и отделяемое
пустул. Методы: вирусоскопический,
вирусологический, серологический.
Наиболее эффективный метод – электронная
микроскопия материала. Можно проводить
световую микроскопию мазков для выявления
телец Пашена-Гварнери. Экспресс-диагностика
– определение аг в мазках (РНИФ) В
отделяемом пузырьков и пустул — аг (РСК,
ИФА)

Выделение
возбудителя производят заражением ХАО
куриных эмбрионов, где вирус образует
белесые бляшки. Идентификацию проводят
в РН, РТГА, РПГА

2,4
Живая коревая вакцина. Что содержит,
для чего и как применяется

аттенуированный
штамм вируса кори (Л-16) на первичной
культуре клеток эмбрионов перепелов.
Применяется для плановой и экстренной
специфической профилактики кори.
Вводится п/к.

3

3,1
Типы взаимодействия вируса с клеткой
хозяина и их патогенетическое значение.

Взаимодействие
вирусов с клеткой хозяина. Существует
четыре типа взаимодействия: 1) продуктивная
вирусная инфекция (происходит репродукция
вируса, а клетки погибают); 2) абортивная
вирусная инфекция (репродукции вируса
не происходит, а клетка восстанавливает
нарушенную функцию); 3) латентная вирусная
инфекция (идет репродукция вируса, а
клетка сохраняет свою функциональную
активность. Приводит рецидивированию
инфекции); 4) вирус-индуцированная
трансформация (клетка, инфицированная
вирусом, приобретает новые, свойства).

3,2
Вирус бешенства. Классификация,
характеристика. Специфическая профилактика

Сем-во:
Rhabdoviridae,
Род: Lyssavirus.
–РНК содержащие вирусы, сложные,
средние, _____________.

Специфическая
профилактика – антирабическая вакцина
и антирабический иммуноглобулин.

3,3
Лабораторная диагностика полиомиелита:
материал, методы

Вирусологический
метод-выделение культуры вируса.
Серологич.метод-нарастание титра АТ,
IgM,
IgG
(РН, РТГА).

Материалом
для диагностики полиомиел. являются:
фекал- в первые 10 дней заболев, отделяемое
носоглотки – в первые 3 дня заболев; из
СМЖ – полиовирус выделяют редко. После
приготовления проб и проверки их на
отсутствие бактерий заражают культуры
клеток (фибробластов человеческого
эмбриона или почек обезьян, HeLa
и др.). Индикацию вируса проводят по ЦПД,
для полиовируса – это полная или
частичная дегенерация клеток, выявляемая
на 2-3 день инкубации. Учет
результатов
РН осуществляется на 5-7 день.во флаконах
с вирусом культура ткани погибает и
цвет среды 199 не меняется (остается
красным). Там же, где вирус нейтрализуется,
среда 199 становится желтой. Положительный
и достоверный результат РН свидетельствует
о принадлежн. вир к соответств. виду и
типу.

3,4
Вакцина Ваксигрип. Что содержит, для
чего и как применяется

Вакцина
Ваксигрип-содержит АГ вир. гриппа —
гемагглютинин. Для профилактики гриппа
А и В. П/к, в/к.

4

4,1
Культивирование вирусов в культуре
клеток ткани: типы культур, способы
индикации и идентификации

Культуры
клеток ткани, используемые для
культивирования вируса, получают чаще
всего из эмбриональных или опухолевых
тканей. Различают первичные, перевиваемые
и полуперевиваемые типы культур клеток.

Приготовление
первичных культур включает следующие
этапы:

• измельчение
  ткани на фрагменты и отмывание в растворе
  Хенкса от крови, клеточного детрита и
  др;

• диспергирование
  клеток путем обработки 0,25% раствором
  трипсина;

• отмывание
  раствором Хенкса полученной суспензии
  клеток и помещение ее в концентрации
  200-400 тыс/мл в культуральные сосуды
  (пробирки, пенициллиновые флаконы и
  др.), куда вносится соответствующая
  питательная среда (199, 199 с добавлением
  бычьей сыворотки и др.);

• термостатирование
  культуральных сосудов при 37
  в течение 2-3 дней для формирования
  монослоя.

Состав
солевых растворов и питательных сред,
применяемых в вирусологии, обеспечивает
сохранение, рост и размножение in
vitro
эукариотических клеток.

Раствор
Хенкса: набор неорганических солей,
глюкоза, феноловый красный (обеспечивает
сохранение рН, осмотическое давление
и состав необходимых неорганических
веществ).

Среда
199: содержит более 60 компонентов, в том
числе 20 аминокислот, 17 витаминов,
составные части нуклеиновых кислот,
глюкозу, 8 минеральных солей и др.

Бычья
сыворотка: вводится в состав питательных
сред в качестве дополнительного источника
белкового питания, витаминов, факторов
роста.

Культуры
клеток ткани наиболее часто используются
для выделения вирусов из патологического
материала и их последующего культивирования.
Индикация вирусов осуществляется по
тем изменениям, которые наблюдаются в
клетках в результате репродукции в них
вирусов. Это так называемое цитопатическое
действие вируса (ЦПД). Поскольку тип ЦПД
зависит от вида вируса, то это имеет
диагностическое значение.

Различают
следующие типы ЦПД вируса: деструкция,
симласто- или синцитообразование и
пролиферация. При сравнении клеточного
монослоя, инфицированного вирусом, с
незараженными клетками контроля отмечают
изменения, которые характеризуют ЦПД
вируса.

Основой
цветной пробы, как метода индикации
вируса, является нарушение метаболизма
культуры клеток ткани в результате
репродукции вируса. Рост клеток
сопровождается накоплением кислых
продуктов метаболизма, сдвигом рН в
кислую сторону и изменением цвета
индикатора фенолового красного с
красного на желтый. Вирусы подавляют
клеточный метаболизм и среда сохраняет
первоначальный цвет. Критерием
достоверности полученных результатов
является контрольная незараженная
культура клеток ткани. Идентификация
вируса – РН с поливалентными,
типоспецифическими сыворотками.

4,2
Вирусы полиомиелита. Классификация,
характеристика. Программа ВОЗ по
глобальной ликвидации полиомиелита;
результаты ее реализации в России и
Красноярском крае

4,3
Основной метод лабораторной диагностики
ВИЧ-инфекции; серологические реакции,
используемые для скринингового,
референтного и арбитражного исследования;
их суть

4,4
Живая паротитная вакцина. Что содержит,
для чего и как применяется

Содержит
аттенуированный штамм вируса паротита
(Л-3), предназначена для плановой и
экстренной профилактики эпидемического
паротита, п/к под лопатку или в область
плеча.

5

5,1
Культивирование вирусов в куриных
эмбрионах: способы заражения, методы
индикации и идентификации

Вирусы
являются абсолютными внутриклеточными
паразитами и поэтому могут размножаться
только в живых клетках. К числу наиболее
распространенных способов их
культивирования относится заражение
куриного эмбриона. Заражение проводят
на ХАО, в амниотическую или аллантоисную
полость, либо в желточный мешок или сам
эмбрион.

В
результате заражения могут происходить
и появляться:

1)
гибель эмбриона;2) дефекты развития;3)
накопление вирусов в аллантоисной
жидкости;

Перед
заражением на ХАО 10-12-суточные эмбрионы
просмотрите в овоскопе. Простым карандашом
на скорлупе отметьте локализацию
воздушного мешка, а сбоку — область без
сосудов. Отмеченные места смажьте 1%
раствором спиртовой настойки йода, а
затем – спиртом. Толстой иглой осторожно
прокалите скорлупу со стороны воздушной
полости и сбоку. Через отверстие сбоку
на ХАО нанесите 0,1 мл исследуемого
материала и залейте проколы расплавленным
карболизированным парафином. Зараженные
эмбрионы поместите в термостат при
Т-35-37
на 48-72 ч (продолжение исследования на
следующем занятии).

Bндикацию
вируса ( макроскопически, микроскопически
при импрегнации серебром) Для серологической
идентификации полученной культуры
вируса используют центрифугат суспензии
ХАО и диагностическую сыворотку.
Идентификацию проводят в реакции
нейтрализации (РН), реакция торможения
гемагглютинации (РТГА, РПГА