Пцр для диагностики ветряной оспы

[09-123]
Varicella Zoster Virus, ДНК [реал-тайм ПЦР]

440 руб.

Молекулярно-генетическое исследование, позволяющее выявить ДНК возбудителя опоясывающего лишая и ветряной оспы – вируса Varicella Zoster в биоматериале.

Синонимы русские

Вирус опоясывающего лишая и ветряной оспы.

Синонимы английские

VZV, DNA, Varicella Zoster virus, DNA, Herpes Zoster, DNA.

Метод исследования

Полимеразная цепная реакция в режиме реального времени.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Амниотическую жидкость, венозную кровь, капиллярную кровь, ликвор, слюну, соскоб с эрозивно-язвенных элементов.

Общая информация об исследовании

Вирус Varicella Zoster – это вирус герпеса 3-го типа, относящийся к семейству Herpesviridae. Он вызывает ветряную оспу или опоясывающий лишай, передаваясь контактным (через зараженные предметы обихода) или воздушно-капельным путем. После попадания в организм вирус размножается в лимфоидной ткани дыхательных путей, затем проникает в кровь, после чего развиваются поражения кожи в виде везикулярной сыпи и другие проявления ветряной оспы (ветрянки). Наиболее часто заболевание встречается в детском возрасте.

Во время беременности вирус может вызывать пороки развития у плода и даже его гибель (если инфицирование произошло на поздних сроках). При первичном заражении Varicella Zoster достигает спинномозговых сенсорных ганглиев, где может бессимптомно находиться годами. При определенных условиях (снижение иммунитета и т. д.), как правило, у взрослых вирус может реактивироваться. Это проявляется опоясывающим лишаем – высыпаниями на коже (в области пораженного нерва), сопровождающимися сильными невралгическими болями.

Наиболее чувствительными и специфичными методами диагностики Varicella Zoster являются молекулярно-генетические исследования, особенно полимеразная цепная реакция (ПЦР). Ее принцип основан на многократном увеличении числа копий специфичного для данного возбудителя участка ДНК. ПЦР позволяет выявить возбудителя даже тогда, когда его количество невелико, например при латентной инфекции нервных ганглиев.

Для чего используется исследование?

• Для диагностики ветряной оспы и опоясывающего лишая.
• Для дифференциальной диагностики (наряду с другими тестами) при предполагаемых энтеровирусных инфекциях (Коксаки, вирусы ECHO), распространенном простом герпесе, импетиго, укусах насекомых, крапивнице, бешенстве, контактном дерматите, герпетиформном дерматите, отрубевидном лишае, лекарственных поражениях кожи, вторичном сифилисе, многоморфной эритеме.

Когда назначается исследование?

• При симптомах ветряной оспы или опоясывающего лишая.

Что означают результаты?

Референсные значения: отрицательно.

Причины положительного результата

• Инфицирование вирусом VZV (ветряная оспа или опоясывающий лишай).

Причины отрицательного результата

• Отсутствие VZV-инфекции.

Выявление ДНК Varicella Zoster Virus не является стопроцентной гарантией присутствия вируса, поэтому о наличии инфекции (ветряной оспы или опоясывающего лишая) оно свидетельствует, если есть симптомы заболевания.

Если ДНК VZV в исследуемом биоматериале не обнаружена, то наличие ветряной оспы или опоясывающего лишая маловероятно.



Также рекомендуется

• Varicella Zoster Virus, IgG
• Varicella Zoster Virus, IgM
• Общий анализ крови (без лейкоцитарной формулы и СОЭ)
• Лейкоцитарная формула
• Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)
• HIV 1, 2 Ag/Ab Combo (определение антител к ВИЧ типов 1 и 2 и антигена p24)

Кто назначает исследование?

Инфекционист, дерматовенеролог, невролог, педиатр, терапевт, врач общей практики.

Литература

• Herpes zoster : recent aspects of diagnosis and control / volume editors, G. Gross, H.-W. Doerr. – Karger, 2006. – 193 pp; – (Monographs in virology ; v. 26).
• Whitley R. G. Varicella-Zoster virus. In: Principles and practice of infectious disease / G. L. Mandell, Bennett J. E., Dolin R (Eds) ; 6th ed. – Churchill Livingstone, Philadelphia, PA 2005. – 2701 p.

Ветряная оспа – острое инфекционное заболевание вирусной этиологии, характеризующееся возникновением характерной пузырьковой сыпи в фоне общего интоксикационного синдрома.

Ветряную оспу вызывает вирус Varicella Zoster семейства герпесвирусов, он же – вирус герпеса человека 3 типа. Это ДНК-содержащий вирус, мало устойчивый во внешней среде, способный к репликации только в организме человека. Инактивация вируса происходит довольно быстро при воздействии солнечного света, ультрафиолетового облучения, при нагревании, высушивании. Резервуаром и источником ветряной оспы являются больные люди в течение 10 последних дней инкубационного периода и пятых-седьмых суток периода высыпания.

Ветряная оспа передается воздушно-капельным путем. Распространение вируса с мелкодисперсным аэрозолем, выделяемым больными при кашле, чихании, разговоре, возможно на достаточно большое расстояние в пределах комнаты, вероятен занос с током воздуха в смежные помещения.

Ветряная оспа у лиц с ослабленной иммунной системой протекает в тяжелой форме, способствует развитию осложнений, вторичному инфицированию, обострению хронических заболеваний. При беременности вероятность передачи ветрянки от матери плоду составляет в первые 14 недель 0,4% и увеличивается до 1% вплоть до 20 недели, после чего риск заражения плода практически отсутствует. В качестве эффективной профилактической меры беременным женщинам, болеющим ветряной оспой, назначают специфические иммуноглобулины, помогающие снизить вероятность передачи инфекции ребенку до минимума. Более опасна ветряная оспа, развившаяся за неделю до родов и в последующий после родов месяц.

Люди обладают высокой восприимчивостью к инфекции, после перенесения ветряной оспы сохраняется напряженный пожизненный иммунитет. Дети первых месяцев жизни защищены от инфекции полученными от матери антителами. Ветрянкой чаще всего болеют дети дошкольного и младшего школьного возраста, посещающие организованные детские коллективы. Порядка 70-90% населения переболевают ветряной оспой в возрасте до 15 лет. Заболеваемость в городах более чем в 2 раза выше, чем в сельских населенных пунктах. Пик заболеваемости ветрянкой приходится на осенне-зимний период.

Сыпь при ветряной оспе вызывает интенсивный зуд, при расчесывании возможно инфицирование везикул с формированием пустул. Пустулы при заживании могут оставить после себя рубец (оспину). Неинфицированные везикулы рубцов не оставляют, после отделения корочек обнаруживается здоровый новый эпителий. При нагноении сыпных элементов общее состояние обычно ухудшается, интоксикация усугубляется. Сыпь у взрослых обычно более обильна, и в подавляющем большинстве случаев из везикул формируются пустулы.

Диагностика ветряной оспы в клинической практике производится на основании характерной клинической картины. Общий анализ крови при ветряной оспе неспецифичен, патологические изменения могут ограничиваться ускорением СОЭ, либо сигнализировать о воспалительном заболевании. Если диагностика затруднена  или высыпания являются нетипичными, например, у пациентов с ослабленным иммунитетом, тогда рекомендуется лабораторное подтверждение.

Вирусологическое исследование подразумевает обнаружение вируса при световой микроскопии содержимого везикул после окраски серебрением (мазок Тцанка). Серологическая диагностика производится с помощью РСК, РТГА в парных сыворотках крови, или определение  ДНК VZV (Varicella Zoster Virus) с помощью  метода прямой иммунофлюоресценции — ПИФ (моноклональные антитела к антигену вируса, меченые флюоресцеином  (флуюоресцентный микроскоп), или полимеразной цепной реакции (ПЦР). Материал для  исследования —   соскобы кожи из основания везикул и везикулярная жидкость. Также надежным подтверждением диагноза является выделение вируса в культуре клеток, однако, вирусная культура, хотя и очень специфическая, но чтобы получить результат потребуется 1-2 недели. Существуют методы иммунноферментного анализа на определение иммуноглобулинов IgM и IgG, по результатам которых можно увидеть, что при первичном заражении на 5-7 день болезни вырабатываются IgM, а через 10-14 дней – IgG. IgM исчезают через 1 месяц, а IgG циркулируют в крови носителя пожизненно.

Поскольку методы ИФА и ПЦР широко доступны и дают очень специфические и чувствительные результаты из массива клинических образцов, это наиболее надежные методы подтверждения инфекции.

Профилактика ветряной оспы заключается в предупреждении заноса инфекции в организованные детские коллективы, для чего при выявлении случаев заболевания производятся карантинные мероприятия. Больных изолируют на 9 дней с момента появления высыпаний, контактировавшие с больными дети разобщаются на 21 день. В случае если день контакта с больным точно определен, ребенок не допускается в детский коллектив с 11 по 21 день после контакта. Контактным детям, не болевшим ранее ветряной оспой, с ослабленным иммунитетом в качестве профилактической меры назначают противоветряночный иммуноглобулин.

Последнее время стала применяться вакцинация против ветряной оспы. В противоэпидемической практике с этой целью используются вакцины Варилрикс (Бельгия) и Окавакс (Япония).

Эпидемиологический надзор включает учёт и регистрацию заболевших, анализ эпидемиологических проявлений инфекции и проведение выборочного серологического скрининга населения.

Ветряная оспа при проникновении в организм человека очень быстро вызывает изменения в крови, чем и обусловлен короткий период инкубации и стремительное проявление везикул на коже. Обычно педиатр ставит диагноз по совокупности визуальных признаков и на основе опроса пациента о характере высыпаний, но иногда рекомендовано провести анализ на ветрянку.

Зачем сдавать анализ на ветрянку

Несмотря на то, что острой необходимости в анализе на ветряную оспу нет, врачи предпочитают у особых категорий пациентов контролировать течение патологии, чтобы вовремя отреагировать на возможные осложнения. Среди категорий пациентов, кому рекомендовано сдавать анализы, отметим:

• взрослых (с первично возникшим герпесом или опоясывающим);
• детей с осложнённым течением заболевания, когда симптоматика стёрта;
• беременных женщин, у которых болезнь может грозить серьёзными последствиями.

Разберёмся, почему именно этим категориям пациентов так важен анализ крови на ветрянку.

Взрослым

У взрослых пациентов заболевание ветряной оспой практически не встречается, поскольку большинство людей болеет заболеванием ещё в детстве и наличие иммунитета к ветряной оспе гарантирует отсутствие рецидива. Поэтому при возникновении и прыщиков на теле врачи в первую очередь подозревают кожную патологию. Узнав, что человек не болел ветрянкой, ситуация кардинально меняется и пациенту назначается анализ на антитела.

Также врачи считают необходимым перестраховаться и с пациентами, перенёсшими ветрянку в детстве. Это поможет при диагностике опоясывающего герпеса, чтобы исключить другую кожную патологию. Именно в лаборатории можно получить окончательный ответ – обнаружен у ребёнка zoster varicella или нет.

Детям

Большинство педиатров не направляют ребёнка на анализ, если признаки ветрянки однозначны и все симптомы свидетельствуют о том, что ребёнок страдает именно этим заболеванием. Сдавать анализ на ветрянку необходимо тогда, когда есть сомнения в диагностике. Очень часто так бывает при атипичном течении заболевания, когда ветряная оспа сопровождается другими проявлениями, порой выступающими на первый план.

Например, при ослабленном иммунитете состояние ребёнка может быть настолько ухудшено, что повышенная температура тела, признаки общей интоксикации и другие симптомы могут склонять к постановке неправильного диагноза.

Беременным

При возникновении симптомов заболевания у беременных анализ на антитела к ветрянке является обязательным, поскольку герпес третьего типа является серьёзной болезнью, которая может угрожать жизни плода. При заражении на ранних сроках бывают самопроизвольные аборты. Если же вирус ветряной оспы проник на поздних сроках вынашивания плода, то возможно рождение мёртвого ребёнка либо малыша с уродствами – гипоплазией конечностей, микроофтальмией, задержкой роста. Поскольку болезнь грозит серьёзными последствиями, то врачи однозначно рекомендуют провести диагностику крови на антитела к ветрянке.

Какие анализы сдавать

Определить ветрянку можно различными видами диагностики. Выбор определяется врачом, в зависимости от того, какой анализ покажет наиболее точный результат. Рассмотрим, какие методы исследования помогут диагностировать патологию.

РИФ

Анализ на ветряную оспу называется реакция иммунофлюоресценции, или сокращённо РИФ. Это достаточно быстрый способ диагностики, который позволяет диагностировать не только наличие, но и распределение соотношения клеток антител к антигенам.

В ходе проведения исследования биоматериал обрабатывается специальным веществом, которое даёт возможность антигенам светиться. При микроскопическом исследовании есть возможность быстро установить наличие антигенов, однако только в том случае, если их концентрация достаточно высока. Отличительная особенность при проведении этого анализа – быстрота получения результата и высокая точность полученных данных.

ПЦР

Полимеразно-цепная реакция является методом с высокой достоверностью полученных результатов и позволяет установить наличие или отсутствие вируса в организме. Врачи отмечают, что расшифровка анализа крови покажет наличие вируса даже в том случае, если его концентрация в крови ничтожна. Особенность метода диагностики в том, что обследование выявляет малую форму вируса.

ПЦР основан на обнаружении копий ДНК вируса. При попадании в организм человека вирус герпеса третьего типа активно увеличивает численность своих частиц, поэтому с обнаружением ветрянки практически никогда не возникает проблем. Обнаружив большое количество копий ДНК герпесвируса, исследование позволяет идентифицировать возбудителя и дать точный ответ, есть заражение ветряной оспой или нет.

ИФА

Иммуноферментный анализ на антитела к ветрянке даёт возможность выявления антител иммуноглобулинов класса M и класса G, а также определить их количество. Таким образом можно провести и качественный, и количественный вирусологический анализ с высокой степенью достоверности.

Норма, как таковая, не существует, поскольку у человека либо есть, либо нет иммуноглобулины определённого типа. Наличие высокого уровня иммуноглобулинов М – антител к вирусу ветряной оспы – говорит о хроническом заражении, т. е. уже ранее перенесённом заболевании ветряной оспы, а вот резкое преобладание в ИФА иммуноглобулинов G говорит об остром течении инфекции, т. е. недавнем проникновении герпесвируса третьего типа в организм больного.

Дополнительные анализы

В случае, если по каким-либо причинам невозможно установить наличие в организме герпесвируса третьего типа и определить с высокой точностью наличие ветрянки, то врачи могут назначить дополнительные исследования, которые помогут уточнить диагноз. В качестве дополнительного проведения анализов на ветрянку используется:

1. Культуральная методика, позволяющая с высокой точностью определить наличие вируса в крови. Возбудитель выделяется и наносится на питательную среду, где за его поведением наблюдают. Как правило, вирус ветряной оспы имеет довольно высокую агрессивность и активно захватывает здоровые клетки. Метод обнаружения возбудителя довольно точный, однако единственным недостатком является длительность проведения исследования – до двух недель.
2. Серологический метод – исследование направлено на выделение иммуноглобулинов G. Применяется преимущественно для герпеса второго типа, но иногда делается в комплексе для определения антител к ветряной оспе.
3. Дот-гибридизация – методика раннего выявления вируса. По принципу исследования больше напоминает полимеразно-цепную реакцию, поскольку определяет именно ДНК возбудителя.

У пациентов с атипичным течением заболевания часто назначают иммунограмму – гемотест, который не столько определяет возбудителя, сколько характеризует реакцию организма на его присутствие. Очень часто при заражении вырабатывается стойкий иммунитет, но при серьёзных заболеваниях именно его снижение провоцирует рецидив ветрянки.

В результате исследования можно диагностировать, хватает количества антител для борьбы с антигеном или нет, насколько сильно противостоит иммунитет заболеванию. Это даёт возможность спрогнозировать медикаментозную поддержку организма – какие препараты и в каких дозировках необходимы пациенту для выздоровления.

Где можно сдать анализ

Сделать исследование на ветрянку можно практически в любой поликлинике или диагностическом центре. Исследование в частных лабораториях проводится быстро и при помощи современных методов диагностики, а удобство получения результатов освобождает пациента от повторных поездок в лабораторию.

Лабораторный анализ на ветряную оспу является исключением и проводится только у отдельных групп пациентов, когда есть необходимость оценки тяжести заболевания и дифференциальной диагностики. При помощи современных методов исследования ИФА, РИФ и ПЦР можно с высокой точностью определить тип возбудителя и подтвердить ветрянку.