Методы лабораторной диагностики оспы

Ветряная оспа – острое инфекционное заболевание вирусной этиологии, характеризующееся возникновением характерной пузырьковой сыпи в фоне общего интоксикационного синдрома.

Ветряную оспу вызывает вирус Varicella Zoster семейства герпесвирусов, он же – вирус герпеса человека 3 типа. Это ДНК-содержащий вирус, мало устойчивый во внешней среде, способный к репликации только в организме человека. Инактивация вируса происходит довольно быстро при воздействии солнечного света, ультрафиолетового облучения, при нагревании, высушивании. Резервуаром и источником ветряной оспы являются больные люди в течение 10 последних дней инкубационного периода и пятых-седьмых суток периода высыпания.

Ветряная оспа передается воздушно-капельным путем. Распространение вируса с мелкодисперсным аэрозолем, выделяемым больными при кашле, чихании, разговоре, возможно на достаточно большое расстояние в пределах комнаты, вероятен занос с током воздуха в смежные помещения.

Ветряная оспа у лиц с ослабленной иммунной системой протекает в тяжелой форме, способствует развитию осложнений, вторичному инфицированию, обострению хронических заболеваний. При беременности вероятность передачи ветрянки от матери плоду составляет в первые 14 недель 0,4% и увеличивается до 1% вплоть до 20 недели, после чего риск заражения плода практически отсутствует. В качестве эффективной профилактической меры беременным женщинам, болеющим ветряной оспой, назначают специфические иммуноглобулины, помогающие снизить вероятность передачи инфекции ребенку до минимума. Более опасна ветряная оспа, развившаяся за неделю до родов и в последующий после родов месяц.

Люди обладают высокой восприимчивостью к инфекции, после перенесения ветряной оспы сохраняется напряженный пожизненный иммунитет. Дети первых месяцев жизни защищены от инфекции полученными от матери антителами. Ветрянкой чаще всего болеют дети дошкольного и младшего школьного возраста, посещающие организованные детские коллективы. Порядка 70-90% населения переболевают ветряной оспой в возрасте до 15 лет. Заболеваемость в городах более чем в 2 раза выше, чем в сельских населенных пунктах. Пик заболеваемости ветрянкой приходится на осенне-зимний период.

Сыпь при ветряной оспе вызывает интенсивный зуд, при расчесывании возможно инфицирование везикул с формированием пустул. Пустулы при заживании могут оставить после себя рубец (оспину). Неинфицированные везикулы рубцов не оставляют, после отделения корочек обнаруживается здоровый новый эпителий. При нагноении сыпных элементов общее состояние обычно ухудшается, интоксикация усугубляется. Сыпь у взрослых обычно более обильна, и в подавляющем большинстве случаев из везикул формируются пустулы.

Диагностика ветряной оспы в клинической практике производится на основании характерной клинической картины. Общий анализ крови при ветряной оспе неспецифичен, патологические изменения могут ограничиваться ускорением СОЭ, либо сигнализировать о воспалительном заболевании. Если диагностика затруднена или высыпания являются нетипичными, например, у пациентов с ослабленным иммунитетом, тогда рекомендуется лабораторное подтверждение.

Вирусологическое исследование подразумевает обнаружение вируса при световой микроскопии содержимого везикул после окраски серебрением (мазок Тцанка). Серологическая диагностика производится с помощью РСК, РТГА в парных сыворотках крови, или определение ДНК VZV (Varicella Zoster Virus) с помощью метода прямой иммунофлюоресценции — ПИФ (моноклональные антитела к антигену вируса, меченые флюоресцеином (флуюоресцентный микроскоп), или полимеразной цепной реакции (ПЦР). Материал для исследования — соскобы кожи из основания везикул и везикулярная жидкость. Также надежным подтверждением диагноза является выделение вируса в культуре клеток, однако, вирусная культура, хотя и очень специфическая, но чтобы получить результат потребуется 1-2 недели. Существуют методы иммунноферментного анализа на определение иммуноглобулинов IgM и IgG, по результатам которых можно увидеть, что при первичном заражении на 5-7 день болезни вырабатываются IgM, а через 10-14 дней – IgG. IgM исчезают через 1 месяц, а IgG циркулируют в крови носителя пожизненно.

Поскольку методы ИФА и ПЦР широко доступны и дают очень специфические и чувствительные результаты из массива клинических образцов, это наиболее надежные методы подтверждения инфекции.

Профилактика ветряной оспы заключается в предупреждении заноса инфекции в организованные детские коллективы, для чего при выявлении случаев заболевания производятся карантинные мероприятия. Больных изолируют на 9 дней с момента появления высыпаний, контактировавшие с больными дети разобщаются на 21 день. В случае если день контакта с больным точно определен, ребенок не допускается в детский коллектив с 11 по 21 день после контакта. Контактным детям, не болевшим ранее ветряной оспой, с ослабленным иммунитетом в качестве профилактической меры назначают противоветряночный иммуноглобулин.

Последнее время стала применяться вакцинация против ветряной оспы. В противоэпидемической практике с этой целью используются вакцины Варилрикс (Бельгия) и Окавакс (Япония).

Эпидемиологический надзор включает учёт и регистрацию заболевших, анализ эпидемиологических проявлений инфекции и проведение выборочного серологического скрининга населения.

Источник

Лабораторная диагностика оспы овец

Оспа овец — острая контагиозная болезнь, протекающая с характерными папулезно-улезными поражениями кожи морды и других мест со слабым волосяным покровом (экзантема) и слизистых оболочек. В 1964 г. на XII сессии Генерального Комитета МЭБ оспу овец внесли в список наиболее опасных (конвенционных) болезней животных. Она широко распространена в соседних странах, занимающихся овцеводством. Эпизодически в результате заноса из неблагополучных соседних стран бывают вспышки в южных регионах России.

Диагноз ставят с учетом эпизоотологических данных, результатов клинического обследования, биопробы и вирусоскопии мазков из свежеразвившихся первичных очагов поражения или мест инокуляции вируса при постановке биопробы. В этих случаях необходимо найти животных с характерными оспинами гнездно-сетчатого строения с кратерообразными углублениями, чего при других экземах, как правило, не бывает. При типичном течении диагностировать оспу не трудно. При тщательном обследовании овец пораженной отары всегда можно найти отдельных животных с типичными оспинами на разных стадиях формирования. У одного и того же животного оспины образуются не одновременно, одни находятся в стадии розеол, другие — в стадии папул.

Лабораторная диагностика оспы основана на выделении вируса, вирусоскопии мазков препаратов из срезанного эпителия розеолы, на присутствие элементарных телец, постановке биопробы, РИФ, РДП.

Выделение вируса.Для исследования берут содержимое везикул или пустул, поверхность которых предварительно очищают ватным тампоном, смоченным эфиром или спиртом. Для гистологического исследования вырезают измененные участки кожи на границе с неизмененными. Патологический материал для вирусологических исследований следует пересылать в замороженном или охлажденном (до 4-6°С) виде. Обычно при абортивном и неясном течении болезни ставят биопробу на неиммунных молодых овцах. Испытуемую суспензию, приготовленную общепринятым методом в разведениях 1:20 и 1:200, инокулируют внутрикожно в бесшерстную поверхность хвоста в дозе 0,1-0,15 мл. Наблюдение ведут в течение 10 дн. В положительных случаях на месте инъекции развивается местный оспенный процесс (розеола, папула, везикула, пустула, некроз), специфичность которого подтверждают методом вирусоскопии мазков, приготовленных из срезанного эпителия розеолы, на присутствие элементарных частиц.

ИФ.Исследование (прямой метод) проводят общепринятым методом. При наличии ВОО в клетках инфицированной культуры с 6-8-го ч после заражения в отдельных участках цитоплазмы появляются светящиеся очаги. Позже начинают светиться обширные участки.

РДП.Для получения сыворотки, годной для использования в РДП, иммунизируют кроликов овиной, делают 2-4 внутривенные инъекции в объеме 2; 1; 0,5 и 0,25 мл с интервалом в 5 дн. Через 7 дн после последней инъекции у кроликов берут кровь для получения сыворотки. Полученные кроличьи сыворотки необходимо истощить культурой фибробластов эмбриона овцы. РДП ставят общепринятым методом.

Дифференциальная диагностика.Оспу овец и коз в стадии образования пустул и корок следует дифференцировать от чесотки, пустулезной экземы и контагиозного пустулезного дерматита (эктимы) овец и коз.

Дата добавления: 2014-02-17; просмотров: 1116; Опубликованный материал нарушает авторские права? | Защита персональных данных

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Лучшие изречения: Увлечёшься девушкой-вырастут хвосты, займёшься учебой-вырастут рога 10236 — | 7929 — или читать все…

Вирусологическая диагностика герпеса

Герпес
относится к распространенным рецидивирующим
инфекциям с характерными пузырьковыми
высыпаниями на коже и слизистых оболочках.
Представители семейства Herpesviridae
(табл. 22) способны также вызывать
врожденные
уродства, поражения различных органов
и систем (нервной
системы, органов дыхания, печени,
слизистой оболочки полости
рта и половых органов, глазного яблока),
онкологические заболевания. Рецидивы
герпеса возникают на фоне снижения
антиинфекционной резистентности при
простуде, гриппе, ОРВИ, других
острых инфекционных заболеваниях и
т.д..

Материалом
для исследования являются содержимое
элементов сыпи, корочки,
слюна, спинномозговая жидкость, трупный
материал (кусочки головного и спинного
мозга, печени, лимфатические
узлы), кровь и др.
Лабораторная диагностика герпетической
инфекции включает экспресс-методы,
вирусологическое и серологическое
исследование
(схема 20).

Вирусологический
метод –
заражение РКЭ на ХАО, культур ткани
(почек
кролика, фибробластов эмбриона человека
или кур, HeLaи
др.). При наличии цитомегаловируса в
клеточных

культурах
через 4-7 дней появляются
многоядерные гигантские клетки с
признаками дегенерации и внутриядерными
включениями, на ХАО РКЭ герпесвирусы
вызывают появление характерных бляшек.
Вирус
ветряной оспы или опоясывающего лишая
вызывает на 6-13 сутки
очаговое ЦПД с появлением в клетках
цитоплазматических и внутриядерных
включений.

Таблица
22. Герпесвирусы и вызываемые
ими заболевания

Представители	Заболевания
α-герпесвирусы Вирус простого герпеса 1 типа (ВПГ-1)	Лабиальный герпес, герпес кожи и слизистых оболочек, офтальмогерпес, генитальный герпес, герпетические менингиты и энцефалиты
Вирус простого герпеса 2 типа (ВПГ-2)	Генитальный и неонатальный (микроцефалия) герпес
Вирус опоясывающего лишая	Ветряная оспа у детей,опоясывающий лишай у взрослых
β-герпесвирусы Цитомегаловирус (ЦМВ)	Врожденные поражения ц.н.с., ретинопатии, пневмонии, гепатиты
γ-герпесвирусы Вирус Эпштейна-Барр (ЭБВ)	Инфекционный мононуклеоз,назофарингеальная карцинома, лимфома Беркитта
Нетипируемые герпесвирусы Вирус герпеса 6 и 7 типов (ВГ-6, ВГ-7)	В-клеточная лимфома, лимфома Ходжкина,синдром хронической усталости
Вирус герпеса 8 типа (ВГ-8)	Саркома Капоши

Схема
20. Вирусологическая
диагностика герпеса

Материал для исследования:содержимое
элементов сыпи, корочки,
слюна, спинномозговая жидкость, трупный
материал (кусочки головного и спинного
мозга, печени, лимфатические
узлы), кровь и др.

Экспресс-диагностика
-электронная
микроскопия, РИФ, ИФА — обнаружение
вируса герпеса или его антигенов в
исследуемом материале

Вирусологический
метод –
заражение РКЭ на ХАО, культур ткани.
Индикация вируса по ЦПД, идентификация
с
помощью РН
на мышах, куриных эмбрионах,
в культуре
клеток

Биопроба:
заражение
лабораторных
животных.
Индикация вируса в мазках-отпечатках
с помощью РИФ, выделение — на культуре
ткани или на ХАО куриного эмбриона

Серологический
метод — выявление
нарастания титров антител в парных
сыворотках больных с помощью РН, РСК,
ИФА, РНГА, РТГадс

Генодиагностика:
ПЦР

Идентификацию
ВПГ
проводят с
помощью РН
на мышах, куриных эмбрионах,
в культуре
клеток.

Серологический
метод — выявление
нарастания титров антител в парных
сыворотках больных с помощью РН, РСК,
ИФА (реже РНГА, РТГадс)
с дифференциацией антител по классам
иммуноглобулинов. Первичная
герпетическая инфекция
характеризуется появлением антител
класса IgM.

Биопроба.
С
целью выделения вируса герпеса
производится заражение лабораторных
животных (новорожденных грызунов, белых
мышей, кроликов,
морских
свинок, хомяков, хлопковых крыс — обычно
в мозг), которые через несколько дней
погибают. Вирус от павших животных можно
обнаружить в мазках-отпечатках с помощью
РИФ, а также выделить на культуре ткани
или на ХАО куриного эмбриона.

Генодиагностика.
Разработана
и широко применяется ПЦР, позволяющая
в течение от 4 до 48 часов определить
несколько вирусов герпеса.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]

Источник

УТВЕРЖДЕНЫ 12 ноября 1985
г., N 115-6а

1.
Общие положения

1. Общие положения

1.1. Оспа — контагиозная
болезнь животных, протекающая с признаками аутоинтоксикации,
лихорадки и узелково-пустулезной сыпи на коже (экзантемы) и на
слизистых оболочках (энантемы), проходящей определенные стадии
формирования: розеола — везикула — папула — пустула — струп.

1.2. Оспа у разных видов
животных вызывается следующими вирусами:

—
крупный рогатый скот — оспы коров или осповакцины;

—
овцы — оспы овец;

—
козы — оспы коз;

—
свиньи — оспы свиней, оспы коров или осповакцины;

—
верблюды — оспы верблюдов, оспы коров или осповакцины.

1.3. Лабораторная
диагностика оспы животных включает в себя:

—
обнаружение в патологическом материале оспенных частиц (вирионов)
методом вирусоскопии;

—
обнаружение цитоплазматических ацидофильных включений в пораженных
участках кожи больного или зараженного животного гистологическим
методом;

—
выделение вируса на куриных эмбрионах (КЭ) с последующей его
идентификацией;

—
биологическую пробу (в сомнительных случаях) на
естественновосприимчивых животных.

2.
Отбор, упаковка и пересылка патологического материала

2.1. Патологический
материал отбирают не менее чем с 5 участков пораженной кожи. Для
сбора и консервирования материала используют стерильные
инструменты, посуду и консервирующие растворы.

Материал от больных
животных, обработанных моющими или дезинфицирующими растворами
(едкого натра и др.), к исследованию не пригоден.

2.2. Для исследования в
лабораторию направляют:

—
мазки, сделанные из содержимого везикул больного животного, и
мазки-отпечатки с оспенных поражений кожи;

—
патологический материал от больных животных (содержимое везикул,
целые папулы и пустулы, иссеченные вместе с субэпидермальной
отечной тканью).

2.3. Мазки высушивают на
воздухе, складывая так, чтобы они не соприкасались между собой, и
упаковывают в целлофан.

2.4. Везикулярную
жидкость собирают в капилляры пастеровских пипеток, которые затем
помещают в пробирки с резиновыми пробками.

2.5. Папулы и пустулы
иссекают ножницами вместе с отечной тканью и помещают в два
стерильных флакона: один — с 50%-ным раствором глицерина, второй —
с 10%-ным раствором формалина.

2.6. Отобранный материал
(пробирки и флаконы с патологическим материалом предварительно
обрабатывают снаружи 3%-ным раствором хлорамина) упаковывают в
металлические коробки или пеналы и направляют с нарочным в
лабораторию. Неконсервированный материал доставляют в термосе со
льдом в день отбора.

3.
Вирусоскопическое исследование

3.1. Для обнаружения
вирусных оспенных частиц (вирионов) исследуют мазки и
мазки-отпечатки из патологического материала окрашенные по методу
Морозова или Пашена (см. приложение 1).

При микроскопии в
препаратах обнаруживают множество мелких частиц кокковидной формы,
расположенных поодиночке, парами или в виде скоплений. При окраске
по Морозову оспенные частицы имеют темно-коричневый цвет, по Пашену
— темно-красный.

3.2. Результат
исследования считают положительным только при обнаружении вирионов
в массовом количестве (в виде россыпей). При отрицательном
результате вирусоскопического исследования, а также при обнаружении
единичных вирионов проводят дальнейшие исследования.

4.
Патогистологические исследования

4.1. Из фиксированных
формалином проб кожи на замораживающем микротоме готовят срезы,
которые окрашивают гематоксилин-эозином.

Источник

Методы лабораторной диагностики оспы

Вирусологическая диагностика герпеса

1. Общие положения

2. Отбор, упаковка и пересылка патологического материала

3. Вирусоскопическое исследование

4. Патогистологические исследования

1.
Общие положения

2.
Отбор, упаковка и пересылка патологического материала

3.
Вирусоскопическое исследование

4.
Патогистологические исследования